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박테리아의 형질 變化(변화) (II)

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작성일 24-05-07 23:29

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7. DMSO를 3.5%(V/V)만큼 가한다(560 ml). 이때 DMSO는 세포 부유액의 중앙에 떨어뜨리고 곧바로 tube를 기울이면서 5～10초간 부드럽게 섞도록 한다.

4. 4,500 rpm, 4°C에서 5분간 원심분리한 후 상층액을 제거하고 tube를 뒤집은 상태로 약 1분간 놓아둔다. 상온에 나와 한번 녹았던 competent cell은 다시 보관할 경우 효율이 대단히 감소하므로 버려야 한다.

10. 미리 차게 해 둔 microfuge tube에 200 ml 씩 분주한다.

2. 위에서 자란 균 2 ml를 200 ml의 SOB medium(20 mM이 되도록 2 M MgCl2 를 2 ml 첨가)에 다시 접종한 후 O.D.600이 0.4가 될 때까지 shaking incubator에서 키운다.

8. 얼음에 5～15분 놓아둔다.

3. 배양액을 멸균된 50 ml conical tube 4개에 나누어 넣고 얼음에 10분 방치한다.

1. Agar plate(LB 또는 SOB)에 자란 E.coli DH5a colony를 SOB medium 3 ml(20 mM이 ...
레포트/공학기술

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실험방법1. Agar plate(LB 또는 SOB)에 자란 E.coli DH5a colony를 SOB medium 3 ml(20 mM이 ... , 박테리아의 형질 변화 (II)공학기술레포트 ,
實驗방법
다.

9. 다시 같은 양의 DMSO를 가하여 최종 농도가 7%(V/V)이 되도록 하고, 얼음에 10~15분 둔다.
박테리아의 형질 變化(변화) (II)
,공학기술,레포트
실험방법

1. Agar plate(LB 또는 SOB)에 자란 E.coli DH5a colony를 SOB medium 3 ml(20 mM이 되도록 2 M MgCl2를 30 ml 첨가)에 접종한 후 밤새 키운다. FSB의 ingredient은 표 1과 같다.

u…(skip)

6. 위와 같이 다시 원심분리한 후 처음 배양 부피의 1/12.5(tube 당 8 ml)되는 FSB에 부유시키고, 두 tube를 합쳐서 16 ml로 만든다. 보통 약 3～4시간이 소요되며, 약 2시간 이후부터 30분마다 O.D.를 계속 측정(measurement)해보는 것이 좋다(효율을 증가시키기 위해서 배양된 세균 수가 108 cells/ml를 넘지 않는 것이 좋다). 理論(이론)상 E.coli는 최적 조건에서 doubling time이 20분이므로 이에 맞추어 시간을 추정해 볼 수 있으나 배양조건을 고려해야 한다.

5. 배양 부피의 1/3(tube당 15 ml) 되는 frozen storage buffer(FSB)에 세포침전물을 부유 시킨 다음, 두 tube씩 합쳐서 30 ml 씩으로 만든 후 얼음에 10분 놓아둔다. 효율을 증가시키기 위해서는 -70°C deep freezer에 보관한 frozen bacterial stock에서 새로 streak한 plate를 사용하는 것이 좋다.

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15967	한국 경제 세미나
15966	한국의 사회복지 歷史(역사)(한국 사회복지 발달사, 한국 사회복지의 발달과정)
열람중	박테리아의 형질 變化(변화) (II)
15964	[인문사회] 독거노인 국내,해외정책 事例(사례)와 문제 해결방안
15963	조직구조론접근의 조직학습 - 조직 구조론 접근의 조직학습 (학습조직, 지식경영, 조직文化, 프로젝트 조직)
15962	개고기 합법화에 대해
15961	성공적 신제품 개발 런칭 사례(instance) (소비자 조사 중심),마케팅,브랜드,브랜드마케팅,기업,서비스…

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7. DMSO를 3.5%(V/V)만큼 가한다(560 ml). 이때 DMSO는 세포 부유액의 중앙에 떨어뜨리고 곧바로 tube를 기울이면서 5～10초간 부드럽게 섞도록 한다.

4. 4,500 rpm, 4°C에서 5분간 원심분리한 후 상층액을 제거하고 tube를 뒤집은 상태로 약 1분간 놓아둔다. 상온에 나와 한번 녹았던 competent cell은 다시 보관할 경우 효율이 대단히 감소하므로 버려야 한다.

10. 미리 차게 해 둔 microfuge tube에 200 ml 씩 분주한다.

2. 위에서 자란 균 2 ml를 200 ml의 SOB medium(20 mM이 되도록 2 M MgCl2 를 2 ml 첨가)에 다시 접종한 후 O.D.600이 0.4가 될 때까지 shaking incubator에서 키운다.

8. 얼음에 5～15분 놓아둔다.

3. 배양액을 멸균된 50 ml conical tube 4개에 나누어 넣고 얼음에 10분 방치한다.

9. 다시 같은 양의 DMSO를 가하여 최종 농도가 7%(V/V)이 되도록 하고, 얼음에 10~15분 둔다.
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실험방법

1. Agar plate(LB 또는 SOB)에 자란 E.coli DH5a colony를 SOB medium 3 ml(20 mM이 되도록 2 M MgCl2를 30 ml 첨가)에 접종한 후 밤새 키운다. FSB의 ingredient은 표 1과 같다.

11. 사용할 때까지 -70°C deep freezer에 보관한다.

검색

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4. 4,500 rpm, 4°C에서 5분간 원심분리한 후 상층액을 제거하고 tube를 뒤집은 상태로 약 1분간 놓아둔다. 상온에 나와 한번 녹았던 competent cell은 다시 보관할 경우 효율이 대단히 감소하므로 버려야 한다.

10. 미리 차게 해 둔 microfuge tube에 200 ml 씩 분주한다.

2. 위에서 자란 균 2 ml를 200 ml의 SOB medium(20 mM이 되도록 2 M MgCl2 를 2 ml 첨가)에 다시 접종한 후 O.D.600이 0.4가 될 때까지 shaking incubator에서 키운다.

8. 얼음에 5～15분 놓아둔다.

3. 배양액을 멸균된 50 ml conical tube 4개에 나누어 넣고 얼음에 10분 방치한다.

9. 다시 같은 양의 DMSO를 가하여 최종 농도가 7%(V/V)이 되도록 하고, 얼음에 10~15분 둔다. 박테리아의 형질 變化(변화) (II) ,공학기술,레포트 실험방법

1. Agar plate(LB 또는 SOB)에 자란 E.coli DH5a colony를 SOB medium 3 ml(20 mM이 되도록 2 M MgCl2를 30 ml 첨가)에 접종한 후 밤새 키운다. FSB의 ingredient은 표 1과 같다.

11. 사용할 때까지 -70°C deep freezer에 보관한다.

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9. 다시 같은 양의 DMSO를 가하여 최종 농도가 7%(V/V)이 되도록 하고, 얼음에 10~15분 둔다.
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